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    上海研域跟您淺談ELISA實驗中的基質(zhì)效應(yīng)與過錯

    發(fā)布時間: 2022-08-23  點擊次數(shù): 1227次

    當(dāng)ELISA實驗中的樣本值較低挨近試劑盒的靈敏度時,就容易發(fā)生樣本值低于空白值的現(xiàn)象,特別是在血清和血漿樣本的查看。ELISA實驗專家對此現(xiàn)象的要素分析有兩個方面,一是基質(zhì)效應(yīng)、二是實驗過錯 。 


    一、基質(zhì)效應(yīng) 

    分析中,基質(zhì)指的是樣本中被分析物以外的組分,基質(zhì)常常對分析物的分析進(jìn)程有顯著的煩擾,并影響分析成果的準(zhǔn)確性,這些影響和煩擾被稱為基質(zhì)效應(yīng)。 


    仿照物與被測樣本在蛋白豐度、復(fù)雜性、pH等要素都會存在差異。當(dāng)單個樣本或少量樣本值低于空白值時,可能是過錯要素,這時應(yīng)增加重復(fù),進(jìn)步操作技術(shù)。當(dāng)許多樣本都低于空白值時,應(yīng)思考基質(zhì)效應(yīng)的影響,建立校正曲線予以修改。 


    ELISA試劑盒在開發(fā)進(jìn)程中,標(biāo)準(zhǔn)品不能選用人或動物血清、血漿作為標(biāo)準(zhǔn)曲線的稀釋液,只能選用其仿照物。當(dāng)樣本的基質(zhì)與其仿照物對比,下降抗原抗體的聯(lián)絡(luò),便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。構(gòu)成樣本值無法計算出數(shù)值,或許數(shù)值為負(fù)。 


    如今比較常用的去掉基質(zhì)效應(yīng)的方法是,經(jīng)過已知分析物濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品,一同盡可能堅持樣本中的基質(zhì)不變,建立一個校正曲線。 


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    二、實驗過錯 

    過錯分為三類,體系過錯、隨機(jī)過錯和過錯過錯。這三類過錯中,體系過錯對樣本值和空白值之間的差異無影響。 

    ELISA實驗中的樣本值低于空白值在過錯方面首要來源于隨機(jī)過錯和過錯過錯。

     

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